Protocols
Sterilization and aseptic technique
Aseptic technique is a core part of plant tissue culture, from preparing media and equipment to handling explants during transfers. This guide covers the main areas labs typically document and shows how to turn your own validated sterilization procedures into repeatable SOPs in xPlant.
Por qué es importante la técnica aséptica
Los flujos de trabajo de cultivo de tejidos dependen del control de la contaminación durante la preparación de los medios, la manipulación de explantes, las transferencias y el mantenimiento del cultivo. Pequeñas diferencias en la preparación o manipulación pueden dificultar la comprensión de por qué un lote se comporta de manera diferente a otro. Documentar los procedimientos asépticos de su laboratorio como SOPs le brinda al equipo una referencia consistente y crea un contexto útil al revisar los registros de contaminación más adelante.
Nota de seguridad: Los procedimientos de esterilización pueden implicar calor, presión, productos químicos, cristalería y otros peligros de laboratorio. Siga las instrucciones del fabricante de su equipo, la información sobre seguridad química y los procedimientos validados de su laboratorio en lugar de tratar los ejemplos de esta guía como instrucciones de funcionamiento.
Esterilización en autoclave
Los autoclaves se utilizan habitualmente en flujos de trabajo de cultivo de tejidos para esterilizar medios, cristalería, herramientas y otros materiales termoestables. Documente el procedimiento de autoclave validado de su laboratorio como SOP para que los operadores puedan consultar el ciclo apropiado, los requisitos de preparación y las notas de manipulación para su equipo y flujo de trabajo. Qué documentar:
- 1Materiales o equipos que se están esterilizando.
- 2Autoclave o equipo utilizado
- 3Ciclo o configuración aprobados por laboratorio
- 4Requisitos de preparación y manipulación.
- 5Notas de seguridad relevantes
- 6Desviaciones u observaciones
Inicie sesión en xPlant: Cree un SOP para el procedimiento de autoclave que ya sigue su laboratorio. Mantenga las configuraciones específicas del equipo y los requisitos de manejo en SOP para que su equipo pueda consultar el mismo procedimiento durante la preparación de los medios.
Esterilización de la superficie del explante
Los procedimientos de esterilización de superficies varían según el material vegetal, la especie, el tipo de tejido y las condiciones del laboratorio. Documente el procedimiento que utiliza su laboratorio para cada tipo de explante, de modo que se pueda hacer referencia a los métodos de esterilización de manera consistente y compararlos con observaciones de cultivos posteriores. Qué documentar:
- 1Material vegetal o explante
- 2Método de esterilización
- 3Pasos del procedimiento y tiempos.
- 4Materiales o soluciones utilizadas.
- 5Variaciones del estándar SOP
- 6Observaciones después del inicio del cultivo.
Variación de especies: Diferentes materiales vegetales pueden requerir diferentes procedimientos. Cuando su laboratorio ajusta un método de esterilización, registre la variación para que el procedimiento pueda compararse con las notas de contaminación y los resultados posteriores del cultivo.
Configuración de transferencia aséptica
Antes de una sesión de transferencia de cultivo de tejidos, siga el procedimiento establecido en su laboratorio para preparar el espacio de trabajo, las herramientas, los materiales y los recipientes de cultivo. Si su laboratorio utiliza una campana de flujo laminar u otro espacio de trabajo controlado, documente su configuración de acuerdo con el fabricante del equipo y los requisitos de su laboratorio. Una configuración de transferencia SOP podría incluir:
- 1Preparación del espacio de trabajo
- 2Comprobaciones de equipos
- 3Preparación de herramientas
- 4Colocación de cultivos y materiales.
- 5Prácticas de manejo durante los traslados
- 6Pasos de limpieza y fin de sesión
Convierta sus procedimientos de esterilización en xPlant SOPs
La esterilización y la técnica aséptica suelen implicar varios procedimientos separados. Mantener la esterilización de los medios, la esterilización de la superficie del explante y la configuración de transferencia como SOPs separados hace que cada flujo de trabajo sea más fácil de mantener, consultar y actualizar. Comience con los procedimientos que ya sigue su laboratorio, luego documente los pasos, el equipo, los tiempos, las notas y las variaciones relevantes en xPlant.
- Esterilización en autoclave. Documente el proceso establecido de su laboratorio para esterilizar medios, recipientes y otros materiales termoestables.
- Esterilización de la superficie del explante. Capture el procedimiento utilizado para material vegetal específico y conserve variaciones específicas de especies o tejidos.
- Configuración de transferencia aséptica. Cree un procedimiento reutilizable para preparar el espacio de trabajo antes de las transferencias de cultivos de tejidos.
¿Listo para documentar su flujo de trabajo aséptico?
Convierta los procedimientos asépticos y de esterilización establecidos en su laboratorio en SOPs que su equipo pueda consultar durante el trabajo de cultivo de tejidos.