Protocols
Sterilization and aseptic technique
Aseptic technique is a core part of plant tissue culture, from preparing media and equipment to handling explants during transfers. This guide covers the main areas labs typically document and shows how to turn your own validated sterilization procedures into repeatable SOPs in xPlant.
Pourquoi la technique aseptique est importante
Les flux de travail de culture tissulaire dépendent du contrôle de la contamination tout au long de la préparation des milieux, de la manipulation des explants, des transferts et de la maintenance de la culture. De petites différences dans la préparation ou la manipulation peuvent rendre difficile la compréhension des raisons pour lesquelles un lot se comporte différemment d'un autre. Documenter les procédures aseptiques de votre laboratoire sous le nom SOPs donne à l'équipe une référence cohérente et crée un contexte utile lors de l'examen ultérieur des enregistrements de contamination.
Note de sécurité: Les procédures de stérilisation peuvent impliquer de la chaleur, de la pression, des produits chimiques, de la verrerie et d'autres dangers en laboratoire. Suivez les instructions du fabricant de votre équipement, les informations sur la sécurité chimique et les procédures validées de votre laboratoire plutôt que de traiter les exemples de ce guide comme des instructions d'utilisation.
Stérilisation en autoclave
Les autoclaves sont couramment utilisés dans les flux de travail de culture tissulaire pour stériliser les milieux, la verrerie, les outils et autres matériaux thermostables. Documentez la procédure d'autoclave validée de votre laboratoire sous la forme SOP afin que les opérateurs puissent référencer le cycle approprié, les exigences de préparation et les notes de manipulation pour votre équipement et votre flux de travail. Que documenter :
- 1Matériel ou équipement à stériliser
- 2Autoclave ou équipement utilisé
- 3Cycle ou paramètres approuvés par le laboratoire
- 4Exigences de préparation et de manipulation
- 5Notes de sécurité pertinentes
- 6Écarts ou observations
Connectez-le dans xPlant: Créez un SOP pour la procédure d'autoclave que votre laboratoire suit déjà. Conservez les paramètres spécifiques à l'équipement et les exigences de manipulation dans SOP afin que votre équipe puisse référencer la même procédure lors de la préparation du support.
Stérilisation de la surface des explants
Les procédures de stérilisation des surfaces varient selon le matériel végétal, l'espèce, le type de tissu et les conditions de laboratoire. Documentez la procédure utilisée par votre laboratoire pour chaque type d'explant afin que les méthodes de stérilisation puissent être référencées de manière cohérente et comparées aux observations de culture ultérieures. Que documenter :
- 1Matériel végétal ou explant
- 2Méthode de stérilisation
- 3Étapes et calendrier de la procédure
- 4Matériaux ou solutions utilisés
- 5Variations par rapport à la norme SOP
- 6Observations après initiation à la culture
Variation des espèces: Différents matériels végétaux peuvent nécessiter des procédures différentes. Lorsque votre laboratoire ajuste une méthode de stérilisation, enregistrez la variation afin que la procédure puisse être comparée aux notes de contamination et aux résultats de culture ultérieurs.
Configuration de transfert aseptique
Avant une séance de transfert de culture tissulaire, suivez la procédure établie par votre laboratoire pour préparer l’espace de travail, les outils, le matériel et les récipients de culture. Si votre laboratoire utilise une hotte à flux laminaire ou un autre espace de travail contrôlé, documentez sa configuration en fonction du fabricant de l'équipement et des exigences de votre laboratoire. Une configuration de transfert SOP peut inclure :
- 1Préparation de l'espace de travail
- 2Vérifications du matériel
- 3Préparation des outils
- 4Placement des cultures et des matériaux
- 5Pratiques de manipulation lors des transferts
- 6Étapes de nettoyage et de fin de session
Transformez vos procédures de stérilisation en xPlant SOPs
La stérilisation et la technique aseptique impliquent généralement plusieurs procédures distinctes. Conserver la stérilisation des milieux, la stérilisation de la surface des explants et la configuration du transfert sous une SOPs distincte facilite la maintenance, la référence et la mise à jour de chaque flux de travail. Commencez par les procédures que votre laboratoire suit déjà, puis documentez les étapes, l'équipement, le calendrier, les notes et les variations pertinentes dans xPlant.
- Stérilisation en autoclave. Documentez le processus établi de votre laboratoire pour stériliser les milieux, les récipients et autres matériaux thermostables.
- Stérilisation de la surface des explants. Capturez la procédure utilisée pour du matériel végétal spécifique et préservez les variations spécifiques aux espèces ou aux tissus.
- Configuration de transfert aseptique. Créez une procédure réutilisable pour préparer l’espace de travail avant les transferts de culture tissulaire.
Prêt à documenter votre flux de travail aseptique ?
Transformez les procédures de stérilisation et d'asepsie établies de votre laboratoire en SOPs auquel votre équipe peut se référer lors des travaux de culture tissulaire.