Protocols
Sterilization and aseptic technique
Aseptic technique is a core part of plant tissue culture, from preparing media and equipment to handling explants during transfers. This guide covers the main areas labs typically document and shows how to turn your own validated sterilization procedures into repeatable SOPs in xPlant.
Perché la tecnica asettica è importante
I flussi di lavoro della coltura dei tessuti dipendono dal controllo della contaminazione durante la preparazione dei terreni, la gestione degli espianti, i trasferimenti e il mantenimento della coltura. Piccole differenze nella preparazione o nella manipolazione possono rendere difficile capire perché un lotto si comporta diversamente da un altro. Documentare le procedure asettiche del tuo laboratorio come SOPs fornisce al team un riferimento coerente e crea un contesto utile durante la successiva revisione dei record di contaminazione.
Nota sulla sicurezza: Le procedure di sterilizzazione possono comportare calore, pressione, sostanze chimiche, vetreria e altri rischi di laboratorio. Seguire le istruzioni del produttore dell'apparecchiatura, le informazioni sulla sicurezza chimica e le procedure convalidate del laboratorio anziché trattare gli esempi presenti in questa guida come istruzioni operative.
Sterilizzazione in autoclave
Le autoclavi sono comunemente utilizzate nei flussi di lavoro delle colture tissutali per sterilizzare terreni, vetreria, strumenti e altri materiali stabili al calore. Documenta la procedura dell'autoclave convalidata del tuo laboratorio come SOP in modo che gli operatori possano fare riferimento al ciclo appropriato, ai requisiti di preparazione e alle note di gestione per la tua attrezzatura e il tuo flusso di lavoro. Cosa documentare:
- 1Materiali o apparecchiature da sterilizzare
- 2Autoclave o attrezzatura utilizzata
- 3Ciclo o impostazioni approvati dal laboratorio
- 4Requisiti di preparazione e manipolazione
- 5Note di sicurezza rilevanti
- 6Deviazioni o osservazioni
Accedi xPlant: Crea un SOP per la procedura di autoclave già seguita dal tuo laboratorio. Mantieni le impostazioni specifiche dell'attrezzatura e i requisiti di gestione nel SOP in modo che il tuo team possa fare riferimento alla stessa procedura durante la preparazione dei media.
Sterilizzazione della superficie dell'espianto
Le procedure di sterilizzazione della superficie variano in base al materiale vegetale, alla specie, al tipo di tessuto e alle condizioni di laboratorio. Documenta la procedura utilizzata dal tuo laboratorio per ciascun tipo di espianto in modo che i metodi di sterilizzazione possano essere referenziati in modo coerente e confrontati con le successive osservazioni colturali. Cosa documentare:
- 1Materiale vegetale o espiantato
- 2Metodo di sterilizzazione
- 3Fasi e tempi della procedura
- 4Materiali o soluzioni utilizzate
- 5Variazioni dallo standard SOP
- 6Osservazioni dopo l'avvio della cultura
Variazione della specie: Materiale vegetale diverso può richiedere procedure diverse. Quando il tuo laboratorio modifica un metodo di sterilizzazione, registra la variazione in modo che la procedura possa essere confrontata con le note di contaminazione e i successivi risultati della coltura.
Configurazione del trasferimento asettico
Prima di una sessione di trasferimento di una coltura tissutale, seguire la procedura stabilita dal laboratorio per preparare l'area di lavoro, gli strumenti, i materiali e i recipienti di coltura. Se il tuo laboratorio utilizza una cappa a flusso laminare o un altro spazio di lavoro controllato, documenta la sua configurazione in base al produttore dell'apparecchiatura e ai requisiti del tuo laboratorio. Una configurazione di trasferimento SOP potrebbe includere:
- 1Preparazione dello spazio di lavoro
- 2Controlli delle attrezzature
- 3Preparazione degli strumenti
- 4Posizionamento di culture e materiali
- 5Disbrigo pratiche durante i trasferimenti
- 6Passaggi di pulizia e fine sessione
Trasforma le tue procedure di sterilizzazione in xPlant SOPs
La sterilizzazione e la tecnica asettica di solito comportano diverse procedure separate. Mantenere la sterilizzazione dei supporti, la sterilizzazione della superficie di espianto e la configurazione del trasferimento come SOPs separati semplifica la manutenzione, la consultazione e l'aggiornamento di ogni flusso di lavoro. Inizia con le procedure già seguite dal tuo laboratorio, quindi documenta i passaggi, le attrezzature, i tempi, le note e le variazioni pertinenti in xPlant.
- Sterilizzazione in autoclave. Documenta il processo stabilito dal tuo laboratorio per la sterilizzazione di terreni, recipienti e altri materiali stabili al calore.
- Sterilizzazione della superficie dell'espianto. Cattura la procedura utilizzata per materiale vegetale specifico e preserva le variazioni specifiche della specie o del tessuto.
- Configurazione del trasferimento asettico. Creare una procedura riutilizzabile per preparare l'area di lavoro prima dei trasferimenti di colture tissutali.
Pronti a documentare il vostro flusso di lavoro asettico?
Trasforma le procedure di sterilizzazione e asettica consolidate del tuo laboratorio in SOPs a cui il tuo team può fare riferimento durante il lavoro di coltura dei tessuti.