Protocols
Sterilization and aseptic technique
Aseptic technique is a core part of plant tissue culture, from preparing media and equipment to handling explants during transfers. This guide covers the main areas labs typically document and shows how to turn your own validated sterilization procedures into repeatable SOPs in xPlant.
Por que a técnica asséptica é importante
Os fluxos de trabalho da cultura de tecidos dependem do controle da contaminação durante a preparação dos meios, manuseio dos explantes, transferências e manutenção da cultura. Pequenas diferenças na preparação ou no manuseio podem dificultar a compreensão de por que um lote se comporta de maneira diferente de outro. Documentar os procedimentos assépticos do seu laboratório como SOPs fornece à equipe uma referência consistente e cria um contexto útil ao revisar registros de contaminação posteriormente.
Nota de segurança: Os procedimentos de esterilização podem envolver calor, pressão, produtos químicos, vidros e outros perigos laboratoriais. Siga as instruções do fabricante do seu equipamento, as informações de segurança química e os procedimentos validados pelo seu laboratório, em vez de tratar os exemplos neste guia como instruções de operação.
Esterilização em autoclave
As autoclaves são comumente usadas em fluxos de trabalho de cultura de tecidos para esterilizar meios, vidrarias, ferramentas e outros materiais estáveis ao calor. Documente o procedimento de autoclave validado do seu laboratório como um SOP para que os operadores possam consultar o ciclo apropriado, os requisitos de preparação e as notas de manuseio para seu equipamento e fluxo de trabalho. O que documentar:
- 1Materiais ou equipamentos sendo esterilizados
- 2Autoclave ou equipamento utilizado
- 3Ciclo ou configurações aprovadas pelo laboratório
- 4Requisitos de preparação e manuseio
- 5Notas de segurança relevantes
- 6Desvios ou observações
Faça login em xPlant: Crie um SOP para o procedimento de autoclave que seu laboratório já segue. Mantenha as configurações específicas do equipamento e os requisitos de manuseio no SOP para que sua equipe possa consultar o mesmo procedimento durante a preparação da mídia.
Esterilização da superfície do explante
Os procedimentos de esterilização de superfície variam de acordo com o material vegetal, espécie, tipo de tecido e condições de laboratório. Documente o procedimento que seu laboratório usa para cada tipo de explante para que os métodos de esterilização possam ser referenciados de forma consistente e comparados com observações de cultura posteriores. O que documentar:
- 1Material vegetal ou explante
- 2Método de esterilização
- 3Etapas e tempo do procedimento
- 4Materiais ou soluções utilizadas
- 5Variações do padrão SOP
- 6Observações após o início da cultura
Variação de espécies: Diferentes materiais vegetais podem exigir procedimentos diferentes. Quando seu laboratório ajustar um método de esterilização, registre a variação para que o procedimento possa ser comparado com notas de contaminação e resultados posteriores de cultura.
Configuração de transferência asséptica
Antes de uma sessão de transferência de cultura de tecidos, siga o procedimento estabelecido pelo seu laboratório para preparar o espaço de trabalho, ferramentas, materiais e recipientes de cultura. Se o seu laboratório usa uma capela de fluxo laminar ou outro espaço de trabalho controlado, documente sua configuração de acordo com o fabricante do equipamento e os requisitos do seu laboratório. Uma configuração de transferência SOP pode incluir:
- 1Preparação do espaço de trabalho
- 2Verificações de equipamentos
- 3Preparação de ferramentas
- 4Colocação de culturas e materiais
- 5Práticas de manuseio durante transferências
- 6Etapas de limpeza e final da sessão
Transforme seus procedimentos de esterilização em xPlant SOPs
A esterilização e a técnica asséptica geralmente envolvem vários procedimentos separados. Manter a esterilização do meio, a esterilização da superfície do explante e a configuração da transferência como SOPs separados torna cada fluxo de trabalho mais fácil de manter, consultar e atualizar. Comece com os procedimentos que seu laboratório já segue e, em seguida, documente as etapas, equipamentos, tempo, notas e variações relevantes em xPlant.
- Esterilização em autoclave. Documente o processo estabelecido em seu laboratório para esterilizar meios, recipientes e outros materiais estáveis ao calor.
- Esterilização da superfície do explante. Capture o procedimento usado para material vegetal específico e preserve variações específicas de espécies ou tecidos.
- Configuração de transferência asséptica. Crie um procedimento reutilizável para preparar o espaço de trabalho antes das transferências de cultura de tecidos.
Pronto para documentar seu fluxo de trabalho asséptico?
Transforme os procedimentos de esterilização e assépticos estabelecidos em seu laboratório em SOPs que sua equipe pode consultar durante o trabalho de cultura de tecidos.